實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qPCR）是基因表達(dá)分析、病原體檢測、基因突變篩查的核心技術(shù)，其檢測速度、靈敏度與數(shù)據(jù)可靠性直接影響科研進(jìn)度與臨床診斷結(jié)果。Bio-Rad 推出的 CFX Opus 96 qPCR 系統(tǒng)，基于先進(jìn)的熱循環(huán)技術(shù)與光學(xué)檢測設(shè)計(jì)，在保持高靈敏度的同時(shí)，大幅提升檢測效率，為高通量基因分析提供高效解決方案，成為生命科學(xué)研究與臨床診斷領(lǐng)域的重要工具。
從熱循環(huán)系統(tǒng)性能來看，CFX Opus 96 采用半導(dǎo)體控溫技術(shù)，結(jié)合 384 孔式加熱模塊（兼容 96 孔板與 384 孔板），升溫速率可達(dá) 6℃/s，降溫速率 5℃/s，較傳統(tǒng) qPCR 系統(tǒng)（升溫速率 3℃/s）效率提升 1 倍。系統(tǒng)的溫度均一性控制在 ±0.3℃以內(nèi)（95℃時(shí)），確保 96 個(gè)反應(yīng)孔內(nèi)的溫度一致性，避免因溫度差異導(dǎo)致的擴(kuò)增效率偏差。例如，在檢測人類基因組中管家基因 GAPDH 的表達(dá)時(shí)，CFX Opus 96 的擴(kuò)增效率變異系數(shù)（CV）<2%，遠(yuǎn)低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的 5%，確保不同樣本間基因表達(dá)定量的可比性。
在光學(xué)檢測方面，CFX Opus 96 配備 6 通道激發(fā)光源與 6 通道檢測濾光片，可同時(shí)檢測 6 種不同熒光標(biāo)記（如 FAM、VIC、ROX、Cy5 等），支持多重 qPCR 反應(yīng)（如同時(shí)檢測靶基因與內(nèi)參基因），大幅減少樣本用量與實(shí)驗(yàn)時(shí)間。系統(tǒng)的光學(xué)檢測靈敏度可達(dá) 10 copies/μL 的靶標(biāo) DNA，能夠檢測低拷貝數(shù)的病原體（如新冠病毒、乙肝病毒）與稀有基因突變（如腫瘤驅(qū)動(dòng)基因突變 EGFR L858R）。在臨床新冠病毒核酸檢測的科研驗(yàn)證中，CFX Opus 96 對病毒 ORF1ab 基因的檢測限低至 50 copies/mL，較傳統(tǒng) qPCR 系統(tǒng)（檢測限 100 copies/mL）靈敏度提升 50%，為早期感染診斷提供支持。
在軟件功能與易用性上，CFX Opus 96 搭載的 CFX Maestro 軟件具備強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析能力。軟件支持絕對定量、相對定量（ΔΔCt 法）、熔解曲線分析等多種實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑瑑?nèi)置的 “自動(dòng)基線校正" 與 “閾值優(yōu)化" 算法，可智能排除背景信號干擾，準(zhǔn)確確定 Ct 值。同時(shí)，軟件支持實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)導(dǎo)出與云端存儲(chǔ)，可生成符合 MIQE（Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments）規(guī)范的報(bào)告，便于科研成果發(fā)表與臨床數(shù)據(jù)追溯。例如，在基因表達(dá)差異研究中，科研人員可通過 CFX Maestro 軟件快速計(jì)算不同處理組間靶基因的表達(dá)倍數(shù)變化，自動(dòng)生成統(tǒng)計(jì)分析圖表，實(shí)驗(yàn)流程耗時(shí)較傳統(tǒng)方法縮短 30%。
目前，CFX Opus 96 qPCR 系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)科研（如基因調(diào)控研究）、臨床診斷研究（如腫瘤液體活檢）、農(nóng)業(yè)科學(xué)（如轉(zhuǎn)基因作物檢測）等領(lǐng)域。隨著基因檢測技術(shù)向高通量、高精準(zhǔn)方向發(fā)展，Bio-Rad 將進(jìn)一步優(yōu)化 CFX Opus 系列的熱循環(huán)效率與光學(xué)檢測通道，為基因表達(dá)分析提供更高效、更可靠的解決方案，助力生命科學(xué)研究與臨床診斷的技術(shù)突破。
關(guān)鍵詞：Bio-Rad CFX Opus 96 qPCR 基因表達(dá)分析 多重檢測 熔解曲線分析
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